层析柱的装载步骤

       层析柱适用于分子筛、离子交换、凝胶渗透与亲和层析。随着液相层析法进入血液制品生产，利用层析法，可纯化血浆中多种蛋白，例如白蛋白等等。层析柱也是生物化学、石油化工、化学分析、疾病诊断等实验室及医学制药的中试及大规模生产*的佳层析工具。产品的装载需要注意：

1.装柱前要仔细看填料的使用说明书，每种填料都有自己的特性，以及特殊的装柱方法，针对不同的空柱，也要注意方法可能不同；

2.填料要加水搅拌成均匀悬液，悬液浓度依填料而不同，一般70－85%，迅速倒入空柱内，或吸或压，流速和具体步骤看说明书。

3.所有柱子尽量做到填料均匀，尤其是用于凝胶层析的柱子。装柱完成后，可用柱效测定的方法检查装填效果。一个装填合格的柱子的理论塔板高度应是填料平均粒径的2－4倍，在此范围内越小越好。

4.选择合适的泵，**是流速满足要求，脉冲尽量小。

5.准备上柱的液体应进行过滤，至少是0.45m。

6.关于纯化，**要考虑的是你的目标：纯度、数量、速度、收率等等，再根据样品的具体情况，尤其是目标蛋白的性质，确定纯化策略。通常三步曲：*步先从大量或复杂样品中将目标蛋白抓出，与主要杂质分离；再用高选择性的层析去除绝大部分杂质；后精细纯化，提供纯度至设定目标。到实际工作中，具体情况具体分析。

7.装柱包括以后使用中不允许柱内进入气泡，柱头事先也要排除气泡。